洁净厂房的沉降菌标准原理

　　洁净厂房的沉降菌标准原理：采用沉降法，即通过于培养皿中利用自然沉降原理收集在空气中的生物粒子，经不少于48小时的培养，在30—35℃下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室(区)的洁净度。

　　洁净厂房沉降菌标准主体内容：

　　1. 器材：

　　高压消毒锅：使用时严格按照说明书操作。

　　恒温培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。

　　培养皿：Φ90mm玻璃培养皿

　　培养基：营养琼脂

　　2. 操作程序

　　2.1 采样

　　将已制备好的培养平皿按要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖盖上后倒置。

　　2.2 培养：

　　2.2.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

　　2.2.2 在30~35℃培养箱中培养，时间不少于48小时。

　　2.2.3 每批培养基应有对照实验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿做对照实验。

　　2.3 菌落记数

　　2.3.1用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5~10倍放大镜检查，是否有遗漏。

　　2.3.2 若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

　　2.4 注意事项

　　2.4.1 测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。

　　2.4.2 采取一切措施防止人为对样本的污染。

　　2.4.3 对培养基、培养条件及其他参数做详细的记录。

　　2.4.4 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。

　　2.4.5 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。

　　3. 测试规则

　　3.1 测试状态

　　3.1.1 沉降菌测试前，被测试洁净室(区)的温湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。

　　3.1.2 沉降菌测试前，被测试洁净室(区)已经过消毒。

　　4.1.3 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。

　　3.2 测试人员

　　3.2.1 测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。

　　3.2.2 静态测试时，室内测试人员不得多于二人。

　　3.3 测试时间

　　3.3.1 对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。

　　3.3.2 对非单向流，如10,000级，100,000级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。

　　3.4 沉降菌计数

　　3.4.1 采样点数目及其布置

　　洁净厂房沉降菌测试的最少采样点数目可查表1确定。在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数。

　　3.5.2 采样点的位置

　　3.5.2.1工作区采样点的位置离地0.8~1.5m左右(略高于工作面)。

　　3.5.2.2 可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。

　　3.6 记录：测试报告中应记录房间温度、相对湿度及测试状态。

　　3.7 结果计算

　　3.7.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数.

　　3.7.2平均菌落数的计算：

　　平均菌落数=(M1+M2+…Mn)/n

　　式中： M1 — 1号培养皿菌落数

　　M2 — 2号培养皿菌落数

　　Mn — n号培养皿菌落数

　　n — 培养皿总数。

　　3.8 结果判定

　　洁净厂房的沉降菌标准用平均菌落数判断洁净室(区)空气中的微生物数。

　　3.8.1洁净室(区)内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。

　　3.8.2若某洁净室(区)内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均需合格。

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